中圖分类号 R962 文献标志码 A 文章编号 1001-0408(2020)11-1353-06

    DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2020.11.12

    摘 要 目的：研究苦参碱对乙醛活化的大鼠肝星状细胞CFSC-8B增殖和胶原合成的影响，并探讨其可能的作用机制。方法：取体外培养的CFSC-8B细胞，分为空白对照组、模型组、阳性对照组(2.5 μmol/L秋水仙碱)和苦参碱低、中、高浓度组(30、60、120 μmol/L)。除空白对照组外，其余各组细胞均加入200 μmol/L乙醛溶液诱导活化，并同时加入相应药液(空白对照组和模型组加入等体积空白培养液)，共同作用24 h后，采用CCK-8法检测各组细胞的存活率。另取细胞分为空白对照组、模型组、阳性对照组(2.5 μmol/L秋水仙碱)和苦参碱中、高浓度组(60、120 μmol/L)，同法活化和加药处理。分别采用酶消化法检测细胞培养液中羟脯氨酸(Hyp)含量;采用酶联免疫吸附法检测细胞培养液中Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)和Ⅲ型胶原蛋白(Col-Ⅲ)含量;采用实时荧光定量-聚合酶链式反应法检测细胞中α-平滑肌激动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β1(TGF-β1)、TGF-β1Ⅰ型受体(TβR-Ⅰ)、TGF-β1Ⅱ型受体(TβR-Ⅱ)、Smad3、Smad4和Smad7 mRNA表达水平;采用 Western blotting法检测细胞中α-SMA、TGF-β1、TβR-Ⅰ、TβR-Ⅱ、Smad3、Smad4和Smad7蛋白表达水平 ......