2.4 夜关门不同溶剂提取物对谷氨酸诱导细胞损伤的影响

    按“2.3”项下方法接种、培养细胞后，将细胞分为空白组、模型组、阳性对照组(水溶性维生素E，50 μmoL/L)和夜关门的乙酸乙酯、二氯甲烷、石油醚提取物组(质量浓度均为25、50、100 μg/mL)，每组设置3个复孔。各给药组细胞先加入含相应药液的培养基预培养12 h，空白组、模型组细胞加入空白培养基，然后除空白组外，其余各组细胞均加入谷氨酸(终浓度为5 mmol/L)诱导损伤24 h，再按“2.3”项下MTT法测定细胞存活率。

    2.5 夜关门二氯甲烷提取物对谷氨酸诱导损伤细胞中ROS水平的影响

    采用DCFH-DA法检测细胞中ROS水平。将细胞用培养基重悬至密度为2.5×104 个/mL，接种到24孔板中，每孔1 mL，将细胞置于37 ℃、5%CO2的培养箱中培养24 h。然后将细胞分为空白组、模型组、阳性对照组(水溶性维生素E，50 μmoL/L)和夜关门二氯甲烷提取物不同质量浓度组(25、50、100 μg/mL)，每组设置3个复孔。空白组细胞不作处理;模型组细胞在培养12 h后，加入5 mmol/L谷氨酸诱导损伤12 h;各给药组细胞分别添加相应药液预处理12 h后 ......